菌落計數(shù)器的操作方法和流程 菌落總數(shù)的測定,一般將受試樣品制成數(shù)種不同的10倍稀釋液,然后取出每種稀釋液1mL,置于無菌培養(yǎng)皿中,與營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基混合。在一定溫度下,培養(yǎng)一定時間(通常為48小時)后,記錄每塊平板上形成的菌落數(shù),并根據(jù)原樣品每克(或每毫升)計算菌落總數(shù)稀釋系數(shù)。 基本操作一般包括:稀釋樣品-倒入平板-孵育48小時-計數(shù)報告。 確定菌落總數(shù)的方法國內(nèi)外基本相同。樣品處理、稀釋、倒入平板和計數(shù)報告沒有明顯區(qū)別,但在一些具體要求上略有不同。例如,一些國家引入了樣品稀釋和澆注培養(yǎng)。 , 吸管中液體的流速、稀釋劑的振蕩幅度、時間和頻率以及儲存時間都被更詳細地規(guī)定。 檢查方法請參考: GB4789.2-94《中華人民共和國食品衛(wèi)生微生物檢驗國家標準菌落總數(shù)的測定》 SN0168-92《中華人民共和國進出口商品檢驗行業(yè)標準出口食品菌落計數(shù)》 1.操作方法:孵育時間后,計算每個平板上的菌落數(shù)。可以用肉眼觀察,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏。記錄每塊平板上的菌落總數(shù)后,計算每塊平板上相同稀釋度的平均菌落數(shù),計算原始樣品中每克(或每毫升)的菌落數(shù),并報告。 2、當達到規(guī)定的孵育時間時,應(yīng)立即計數(shù)。如果不能立即計數(shù),應(yīng)將平板置于 0-4°C,但不超過 24 小時。 3、計數(shù)時,選擇菌落數(shù)在30~300之間的平板(SN標準要求25~250個菌落)。如果在30-300之間有兩種稀釋度,均應(yīng)按國標方法選擇。比值確定,比值小于等于2取平均值,比值大于2取小數(shù)(有的規(guī)定不考慮比值,均報平均值)。 4. 如果所有稀釋液不在計數(shù)間隔內(nèi)。如果都大于300,取最高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)并報告。如果全部小于 30,則將zui低稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋因子以報告它。如果菌落數(shù)大于 300,有的小于 30,但沒有一個在 30 到 300 之間,則應(yīng)將zui接近 300 或 30 的平均菌落數(shù)乘以稀釋系數(shù)來報告。如果所有稀釋液都生長為菌落,則應(yīng)報告為小于 1 乘以zui 低稀釋系數(shù)。一些規(guī)定將在上述情況下計算的菌落數(shù)報告為估計值。 5、不同稀釋度的菌落數(shù)應(yīng)與稀釋倍數(shù)成反比(同一稀釋度的兩塊平板上的菌落數(shù)應(yīng)基本接近),即稀釋倍數(shù)越高,菌落數(shù)越少,稀釋系數(shù)越低,菌落數(shù)越多。如有倒轉(zhuǎn)現(xiàn)象,應(yīng)視為檢驗有誤(有些食品有時可能會出現(xiàn)倒轉(zhuǎn)現(xiàn)象,如酸性飲料等),不應(yīng)作為樣品計數(shù)報告的依據(jù)。 6.當平板上有鏈狀菌落生長時,如果鏈狀菌落之間沒有明顯的邊界,則應(yīng)計為1個菌落。如果有來自不同來源的多條鏈,則每條鏈都應(yīng)計為一個菌落。計算,不要分別計算鏈上生長的每個菌落。如果片狀菌落生長,這種板通常不適合。如果片狀菌落少于平板的一半,另一半均勻分布,則半平板上的菌落數(shù)可以乘以2,代表整盤上的菌落數(shù)。 7、當計數(shù)板中菌落數(shù)過多時(即所有稀釋度都大于300),但分布很均勻時,可用板的一半或1/4進行計數(shù)。然后乘以相應(yīng)的稀釋系數(shù)作為平板上的菌落數(shù)。 8、菌落數(shù)的報告,按照國標方法,菌落數(shù)在1~100個時,按實際數(shù)報告。如果大于100,報前兩位有效數(shù)字,第三位四舍五入。固體試樣以克(g)報告,液體試樣以毫升(ml)報告,表面摩擦以平方厘米(cm2)報告。 |